책임운영기관 농촌진흥청 국립축산과학원 (로고)

중간엽 줄기세포는 반려동물의 질병이나 고통으로부터 도움을 줄 수 있을 뿐만 아니라, 삶의 질을 향상시키기 위한 치료로 각광 받고 있다. 최근, 체외배양을 통하여 구축된 중간엽 줄기세포의 안전성과 효율성에 관한 조사가 이루어 지고 있는 실정이다. 따라서, 본 연구에서는 반려견의 지방조직으로부터 중간엽 줄기세포를 확립하였다. 비글견 두 마리 로부터 지방 조직을(5g) 채취하여 collagenase type I 처리 후 2-6×106 세포를 획득하였으며, 젤라틴이 코팅된 75T flask에서 배양하였다. 배양 48시간 후 대부분이 flask에 부착되었으며 섬유아세포와 같은 형태를 가지고 있는 것을 관 찰하였다. 배양 5일 후 90% 이상 자란 것을 확인하였고, 계대배양을 실시하였다. 중간엽 줄기세포 마커인 CD44와 CD90을 이용하여 Flow cytometry로 분석한 결과 높게 발현되는 것을 확인하였다. 중간엽 줄기세포의 지방, 연골, 골 로 분화능을 확인하기 위하여 Oil red O, alizarin red 그리고 alcian blue로 염색을 진행하였다. 그 결과 분화 유도 4주째에 지방 분화의 경우 Oil red O 염색시 강하게 발현되는 것을 확인하였다. 또한 연골 분화의 경우 calcium nodules과 염색으로 분화가 진행되었음을 확인하였다. 골 분화의 경우 alizarin red로 염색되는 것을 관찰하였다. 또한, 체외 배양한 개 지방 유래 중간엽 줄기세포의 핵형을 확인해 본 결과 78개로 정상적인 것을 확인하였다. 따라서, 본 연구에서는 개 지방 조직으로부터 중간엽 줄기를 성공적으로 확립하였으며, 이는 질병으로부터 고통 받는 반려견에게 유익한 치료 수단으로 이용될 수 있을 것으로 사료된다.