책임운영기관 농촌진흥청 국립축산과학원 (로고)

말 정액 희석은 주로 2단계 희석 방법을 이용한다. 말 정액은 정장액이 많고 교양물질이 있으므로 필터링을 실시하여 교양물질을 먼저 제거해야 한다. 또한, 농도가 동결에 적합하지 않을 정도로 낮은 경우가 많으므로 원심분리를 실시할 필요가 있다.

▣ 말 정액 희석 및 보존
1) 말 정액을 채취하기 전 정자를 희석하기 위한 INRA 96 희석제를 34∼37℃로 유지 한다.
2) 채취한 신선 정액을 희석용 병에 옮기고 INRA 96을 원정액의 부피 1/5 정도를 점적한다. 2∼3분 후 다시 희석액을 투입하여 1:1까지 희석한다.
3) 희석이 끝난 정액은 원심분리하기 전 정자의 활력을 저하시켜줄 필요가 있다. 20∼22℃의 물에 침체시키거나 상온에서 10∼15분간 방치하여 온도를 저하시킨 후 20℃로 맞춘 원심분리기에 600g 원심분리력으로 10분간 처리한다.
4) 원심분리 후 상층액을 제거하고 정자 펠릿을 저온 보온컵으로 옮겨 INRA Freeze 희석제로 천천히 정액를 희석한다.(INRA freeze는 20∼22℃로 유지)
5) 입구가 넓은 보온병(1L 용)에 20℃로 조정된 물 250ml을 담고 비닐봉투를 넣어 정액 희석용 튜브와 차단한다. INRA freeze 희석제를 100∼150 x 106개/ml 농도가 될 때까지 점적한다.
6) 희석이 완료된 정액은 냉장처리를 위해 2∼3시간 동안 중탕법을 이용하여 5℃로 낮춘다. 냉장된 정액을 정액 스트로에 충전한 후 간이동결법(액체질소가 채워진 스티로폼 박스에 액체질소보다 5cm 높은 높이에 충전된 스트로를 위치한 후 동결 함)을 이용하여 10분간 동결한다.


난지축산연구소 신상민